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    豬Ag-NORs與毛色的關系及其育種中的應用
    http://www.dzyan360.cn | 時間:2011-06-29 06:47:58 | 關注人次[] | 字體設置:
     

    1.前言

    Ag-NORs又稱核仁銀染區,被定位于豬的No.8No.10染色體短臂的次縊痕區,不同品種豬的Ag-NORs數目不同,柳萬生(1989)曾報道,外國豬種的Ag-NORs頻率顯著低于中國地方豬種。于汝梁(1992)初步認為Ag-NORs的頻率與豬的毛色有關。我們在用約克夏(純白色)作為父本、用八眉豬(純黑色)作為母本雜交培育適于青藏高原氣候環境的母本品系中,系統的研究了豬Ag-NORs的遺傳規律及其與毛色的關系。發現豬的Ag-NORs與毛色基因連鎖,并將其應用于后代的毛色純合中,效果顯著,現描述如下。

    2.材料與方法

    1)材料來源:根據選育方案和毛色分離規律,將八眉豬和約克夏豬的雜交一代互交后分離出的黑色和白色豬分別組成黑色和白色品系進行閉鎖選育。本研究采用的數據均為以上品系選育群豬毛色的的統計資料。

    2)研究方法:采取外周血淋巴細胞培養68-72小時后,制備染色體玻片標本,Bloom法銀染,光鏡下檢查并統計分裂中期細胞的Ag-NORs數目,分析豬的染色體上的Ag-NORs分布區域和數目,然后進行統計分析,并用于指導每個世代的選種選配。

    3.結果與分析

    3.1 Ag-NOR數的遺傳規律

    八眉豬、約克夏及其雜一代的Ag-NORs分布情況列于表1。方差分析表明,約克夏豬、八眉豬及其F1代豬的Ag-NORs,不論是數目還是分布,其間差異均極顯著(P<0.01);各純種豬內部雖有差異,但差異不明顯(P0.05)。

    幾乎在所有細胞中的2No.10染色體均被銀染,Ag-NORs數目的變化只與No.8號染色體的Ag-NORs能否被銀染有關,這與柳萬生、于汝梁等人的研究結果基本一致。約克夏豬和八眉豬Ag-NORs的眾數分別為23,其雜一代豬Ag-NORs的眾數為3,和親本八眉豬的相同,雜一代互交后產生的F2Ag-NORs的數目只分離出眾數為23兩種個體。這一點與于汝梁等人(1992)的研究結果不同,其原因是所研究的豬種不同,于汝梁等人研究的長白豬的Ag-NORs眾數為2,楓涇豬為4,雜交F1代的眾數為3,F1互交產生的F2代的Ag-NORs則分離出眾數為4、3、2的個體,符合孟德爾定律。而本次研究的親本約克夏和八眉豬的Ag-NORs眾數分別為23,若以眾數統計,其結論與孟德爾定律不符,但數目卻符合,考慮到Ag-NORs的數目變化主要與No.8染色體上的Ag-NORs是否被銀染有關,因而本次研究提出以No.8上的Ag-NORs數目(百分數)進行統計分析,應用范圍似乎更廣泛。

    1.八眉豬、約克夏及其雜一代的Ag-NORs分布

    Table 1.Number of Ag-NORs of Bamei, Yorkshire and it's cross breed

     

    品種

    breed

    頭數

    細胞

    總數

    2Ag-NORs

    3Ag-NORs

    4Ag-NORs

    細胞數

    頭均

    %

    細胞數

    頭均

    %

    細胞數

    頭均

    %

    約克夏

    2

    150

    124

    41.5

    82.67

    20

    8

    13.33

    6

    1.5

    4

    2.21

    2

    八眉豬

    6

    300

    15

    205±3.27

    5

    213

    35.5±4.04

    71

    72

    12±3.41

    24

    3.19

    3

    F1

    14

    700

    239

    17.07±3.85

    34.14

    440

    31.43±4.18

    62.86

    21

    1.5±1.29

    3

    2.69

    3

     

    3.2 Ag-NORs數與毛色遺傳的關系分析

    3.2.1目前已知豬的毛色由一對主效基因控制,白色對黑色為顯性。本研究中約克夏為純白(設為顯性純合子),八眉豬為純黑(設為隱性純合子),兩者的F1全為白色(部分帶小塊黑斑),F1代互交后產生的F2代毛色分離。據對77784頭仔豬統計,白色個體598頭,占76.28%,黑色個體138頭,占17.60%,同時還分離出黑白毛色相間的個體48頭,占6.12%,卡方檢測符合孟德爾定律。

    2.約八合成母系各代Ag-NORs與毛色的關系

     

    毛色

    頭數

    細胞

    總數

    2Ag-NORs

    3Ag-NORs

    4Ag-NORs

    No.8

    細胞數

    %

    細胞數

    %

    細胞數

    %

    F1

    W

    40

    2000

    597

    29.85

    1398

    69.9

    55

    2.75

    2.80

    3

     

    F2

    B

    4

    200

    10

    5

    135

    67.5

    55

    27.5

    3.23

    3

    61.25

    C

    4

    200

    65

    32.5

    115

    57.5

    20

    10

    2.8

    3

    38.75

    W

    84

    4200

    1287

    30.64

    2862

    68.14

    51

    1.22

    2.71

    3

    35.36

    W

    29

    1450

    883

    60.9

    560

    38.62

    7

    0.48

    2.4

    2

    19.79

    W

    113

    5650

    2170

    38.41

    3422

    60.57

    58

    1.02

    2.63

    3

    31.31

     

    Ag-NORs為等顯性遺傳,約克夏的Ag-NORs眾數為2,八眉豬Ag-NORs的眾數為3,二者的雜一代F1在毛色上將均為白色雜合子,也為Ag-NORs的雜合子。F1代互交后所生F2代的Ag-NORs出現嚴重分離,一些個體的眾數為3,另一些個體的眾數則為2。同時發現,Ag-NORs眾數為2的個體毛色全為白色,眾數為3的毛色多為白色(包括帶有黑斑的個體),而部分為黑色(包括帶有白斑點的個體)或黑白花色(大片黑白相間的個體)。進一步對不同毛色F2代豬的Ag-NORs分析(表2)發現,4頭黑色F2代豬的Ag-NORs不論是數目還是分布均已基本接近其親本八眉豬,4頭黑白花豬則介于純黑和純白的個體之間;純黑和黑白花組內個體之間的Ag-NORs差異不顯著(P>0.05),而純白組內個體間卻存在顯著差異(P<0.05),進一步將純白的F2代豬根據眾數23分為兩組分別統計,第一組29頭其Ag-NORs均數降為2.4,第二組84頭,其Ag-NORs均數則增為2.71,顯著性檢驗差異顯著。說明豬的Ag-NORs與毛色之間卻具密切關系。

    3.2.2  Millink et al (1992)對家豬和歐亞野豬的Ag-NORs差異進行研究表明,Ag-NORs與家豬品種的起源進化有關,具有轉錄活性的rRNA基因數目(Ag-NORs數)具有較高的保守性和重現性。約克夏豬No.8染色體的Ag-NORs多不表現活性(僅11%),毛色表現為純白色,八眉豬No.8染色體上的Ag-NORs 59.5%有活性,毛色表現為純黑色,F2代中黑色豬No.8 上的Ag-NORs 61.25%有活性,黑白花豬No.8 上的Ag-NORs 38.75%有活性,白色豬No.8 上的Ag-NORs  31.31%有活性。根據這一事實,具活性的No.8上的 Ag-NORs愈多,其毛色愈黑,具活性的No.8 上的Ag-NORs愈少,則毛色愈白。結合F136.3%Ag-NORs有活性,高于F2代中的白色豬,低于F2代中的黑白花豬,因而毛色雖接近白色,但實為黑白花色類的雜合子,似乎可以初步得出,對于約八合成母系,40%No.8上的Ag-NORs是否具活性,為判斷毛色是黑色純合子的臨界值,而30%為判斷白色豬是白色純合子還是白色雜合子的臨界值。

    3.3利用 Ag-NORs作為遺傳標記進行豬毛色選育的效果

    根據以上結論,在選種中利用測定的后備豬的Ag-NORs的數值大小來判定毛色基因的純合與雜合性,并進行選配,加快了毛色的純化進程。例如在進行F2 代選種時,公豬全部從以上假定為白色純合子的29頭中選留,母豬也盡可能從假定為白色純合子的后備豬中選留,僅一個世代的一次性選擇,即使白色品系中的黑色個體的出現率降為 2.33%,遠遠低于 6.25% 的理論值,黑色基因的頻率降為15.26%,白色基因的頻率增為84.74%,白色個體的頻率增為97.67%。相當于采用傳統的每個世代僅淘汰黑色純合子方法選擇的11個世代的效果,見(表3)。

    3    白色品系各世代豬的毛色統計表          單位:頭、%

                 

    世代

    (品種)

         

          

          

      

    實際比例

    理論比例

       

    實際比例

       

    實際比例

       約克夏

    7

    100

    100

    0

    0

    0

    0

       八眉豬

    0

    0

    0

    64

    100

    0

    0

    約八F1

    538

    100

    100

    0

    0

    0

    0

    約八F2代白系

    613

    77.59

    75

    122

    15.44

    55

    6.96

    約八F3代白系

    503

    97.67

    93.75

    6

    1.165

    6

    1.165

     來源:豬病新干線  作者:豬病新干線 
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