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    轉移因子對豬偽狂犬和支原體疫苗的免疫效果影響試驗
    http://www.dzyan360.cn | 時間:2011-05-03 16:40:22 | 關注人次[] | 字體設置:

     要:將提取的牛脾轉移因子分別與豬偽狂犬、豬支原體疫苗混合后免疫30、40日齡仔豬,免疫后14天采血分離血清,并用ELISA方法檢測血清中的抗體水平。試驗結果表明,提取的轉移因子能增強豬偽狂犬和支原體疫苗的免疫效果,抗體OD值分別比對照組提高了3.7%和2.1%,但與對照組相比,抗體水平差異不顯著(P>0.05)。
    關鍵詞:轉移因子 免疫效果 增強
     
    轉移因子(Transfer Factor,TF)是白細胞中具有免疫活性的T淋巴細胞所釋放的一類小分子可透析物質,具有傳遞免疫信息、激發免疫細胞活性、增強淋巴細胞轉化、提高機體免疫功能等作用,該活性產物能夠將致敏淋巴細胞的免疫信息傳遞給未致敏的受體淋巴細胞[1,2]。豬偽狂犬病和豬支原體肺炎是危害養豬業的重要傳染病,預防該類疾病主要依賴于成功的免疫,轉移因子作為一種新型的免疫增強劑,在提高疫苗的免疫抗體水平和抗病能力上發揮著特定作用[3,4],本試驗旨在探討轉移因子與豬偽狂犬和豬支原體疫苗聯合應用時對免疫抗體水平的影響。
    1 材料和方法
    1.1 試驗動物 品種相同、體重相近的30日齡仔豬(未免疫豬偽狂犬和豬支原體疫苗)48頭,由成都乾坤動物藥業有限公司實驗豬場提供。
    1.2 實驗藥品及試劑 豬偽狂犬滅活疫苗由大北農公司提供(批號:090315),豬支原體滅活疫苗由上海海利有限公司提供(批號:090212)。豬偽狂犬病毒ELISA抗體檢測試劑盒(批號:090118),由深圳綠詩源生物技術有限公司提供;豬肺炎支原體ELISA抗體檢測試劑盒(090314),為美國IDEXX公司產品。
    1.3 轉移因子提取 取成年健康牛的新鮮脾臟,去除被膜和結締組織,勻漿后加入3倍體積的無菌生理鹽水,用36%的乙酸調PH值至4.5,置-30℃冷凍后再37℃搖床上解凍,反復凍融5次。用4%的NaHCO3調PH值至6.6,于4℃、3000 rpm/min離心30min,收集離心取上清液用0.45um的微孔濾膜過濾,將濾液通過中空纖維超濾器超濾,截留分子量6000,收集超濾液,加5‰的煙酰胺,0.22um微孔濾膜過濾除菌[5-7],并進行蛋白質鑒定及多肽含量測定[8,9]。
    1.4 豬偽狂犬疫苗免疫試驗 將24頭仔豬隨機分為試驗組和對照組,每組12頭,做好編號。免疫前1天每頭仔豬前腔靜脈采血2ml,分離血清測定豬偽狂犬母源抗體水平。試驗組于第2天每頭注射混合的豬偽狂犬疫苗1頭份+轉移因子2ml,對照組每頭注射豬偽狂犬疫苗1頭份,14天后采血測定抗體水平,測定方法參照試劑盒,在630 nm測量對照和樣品的OD值。檢測結果的判定標準為:OD值<0.2為陰性,0.2<OD值<0.4為可疑,OD值>0.4為陽性,試驗數據采用SPSS11.5統計學軟件作T檢驗,進行顯著性分析。
    1.5豬支原體疫苗免疫試驗 將24頭仔豬隨機分為試驗組和對照組,每組12頭,做好編號。免疫前1天每頭仔豬前腔靜脈采血2ml,分離血清測定豬支原體抗體水平;試驗組于第2天每頭注射混合的豬支原體疫苗1頭份+轉移因子2ml,對照組每頭注射豬支原體疫苗1頭份,14天后采血測定抗體水平,測定方法參照試劑盒。在650 nm測量對照和樣品的OD值,檢測結果的判定標準為:S/P(樣品OD值/陽性對照OD值)<0.3為陰性,0.3≤S/P≤0.4為可疑,S/P>0.4為陽性。試驗數據采用SPSS11.5統計學軟件作T檢驗,進行顯著性分析。
    2 結果
    2.1 轉移因子提取 提取的轉移因子蛋白質反應陰性,多肽含量采用Folin酚法測定為5.4mg/ml。
    2.2 豬偽狂犬疫苗免疫試驗 由表1可見,在免疫前1天,對照組和試驗組的母源抗體平均水平已下降至臨界保護范圍之內(OD值在0.4左右),兩組抗體水平差異不顯著(t =0.324,P>0.05),此時進行偽狂犬疫苗的免疫受母源抗體的干擾較小,有利于抗體的產生;免疫后14天,對照組和試驗組的平均抗體水平均升高至臨界保護力之上,抗體平均OD值分別為0.513和0.532,雖然兩組差異不顯著(t = -0.814,P>0.05),但試驗組的平均抗體OD值比對照組提高了3.7%,說明轉移因子與豬偽狂犬疫苗聯
    合應用可有效提高豬偽狂犬疫苗的免疫抗體水平,具有一定的免疫增強作用。
    表1:轉移因子對豬偽狂犬抗體水平的影響

    對照組免疫前OD值
    試驗組免疫前OD值
    對照組免疫后OD值
    試驗組免疫后OD值
    0.435
    0.367
    0.511
    0.536
    0.428
    0.465
    0.564
    0.561
    0.359
    0.531
    0.491
    0.517
    0.503
    0.524
    0.468
    0.533
    0.427
    0.354
    0.499
    0.486
    0.364
    0.335
    0.566
    0.547
    0.298
    0.286
    0.572
    0.542
    0.483
    0.187
    0.386
    0.575
    0.514
    0.469
    0.521
    0.527
    0.328
    0.487
    0.492
    0.375
    0.474
    0.462
    0.568
    0.607
    0.526
    0.523
    0.519
    0.574
    平均值 0.428±0.076
    0.416±0.109
    0.513±0.053
     0.532±0.058

    注:平均值為同列數據的平均數±標準差,陰性對照OD值為0.053,陽性對照OD值為1.181。
    2.3 2.2 豬支原體疫苗免疫試驗 免疫前對照組和試驗組的抗體水平差異不顯著(t = 0.857,P>0.05),兩組抗體水平均為陰性(S/P值<0.3),主要是由于母豬未免疫豬支原體疫苗;免疫后14天,試驗組和對照組的抗體水平均轉陽,獲得了具有免疫保護力的抗體水平(S/P值>0.4),其中試驗組的抗體OD值比對照組提高了2.1%,但兩組抗體水平差異不顯著(t = -0.336,P>0.05),結果見表2。
    表2:轉移因子對豬支原體抗體水平的影響

    對照組免疫前OD值
    試驗組免疫前OD值
    對照組免疫后OD值
    試驗組免疫后OD值
    0.181
    0.215
    0.426
    0.285
    0.175
    0.187
    0.453
    0.437
    0.192
    0.193
    0.398
    0.391
    0.156
    0.091
    0.294
    0.503
    0.221
    0.125
    0.411
    0.518
    0.089
    0.068
    0.507
    0.446
    0.075
    0.087
    0.396
    0.452
    0.165
    0.167
    0.287
    0.445
    0.183
    0.203
    0.465
    0.397
    0.213
    0.175
    0.478
    0.452
    0.158
    0.134
    0.459
    0.385
    0.224
    0.184
    0.532
    0.511
    平均值0.169±0.047
    0.152±0.050
    0.426±0.075
    0.435±0.065
    S/P值 0.225
    0.202
    0.566
    0.578

    注:平均值為同列數據的平均數±標準差,陰性對照OD值為0.248,陽性對照OD值為0.752。
    3 小結與討論
    試驗結果表明,轉移因子與豬偽狂犬和豬支原體疫苗合用后,其免疫后的抗體OD值分別提高3.7%和2.1%,說明牛脾轉移因子對豬偽狂犬和豬支原體疫苗具有一定的免疫增強效果,但其增強效果不明顯。史秀山(2004)、潘天虎(2006)[10、11]報道,轉移因子能顯著增強狂犬病疫苗、豬瘟免疫的效果。這與本實驗結果不盡一致,分析其原因,這可能與疫苗本身的免疫學特性有關系。
     
    參考文獻
    [1] FUJISAWA T, YAMAGUCHI Y. Postoperative immunostimulation after complete resection improves survival of patients with stage I nonsmall cell lung carcinoma[J]. Cancer, 1996,78(9):1892-l898.
    [2] PIZZA G, De VINCI C, CUZZOCREA D, et a1.A preliminary report on the use of transfer factor for treating stage D3 hormone2 unresponsive meta static prostate cancer[J]. Biotherapy,1996,9(10):123-132.
    [3] PRASAD U, Bin JALALUDIN M A, RAJADURAI P, et a1. Transfer factor with anti-EBV activity as adjuvant therapy for nasophargngeal carcinoma: a pilot study[J]. Biotherapy,1996,9(1-3):109-115.
    [4] 何理平.轉移因子在動物醫學上的研究進展[J]. 江西畜牧獸醫雜志,2004,2: 3-5.
    [5] 閆肅, 楊琳,申鎮維, 等. 轉移因子口服液制備方法的研究[J].中國衛生工程學,2007,6(6): 355-356.
    [6] 顧平, 陳德有.豬脾轉移因子生產工藝的改進[J].中國生化藥物雜志,2001,22(2): 94-95.
    [7] 朱天新, 任晚瓊, 袁彩君. 豬脾轉移因子生產方法的比較[J].中國生化藥物雜志, 2005,26(1): 44-45.
    [8] 宋愿智, 蔡曉民, 崔玉綿.轉移因子質量標準異同淺析[J]. 西北藥學雜志,2000,15(15): 219-220.
    [9] 賴海昌, 陳菁, 賴文輝. 豬脾轉移因子多肽含量測定方法的改進[J].廣東藥學院學報, 1995, 11(3): 188-189.
    [10] 史秀山.轉移因子增強狂犬疫苗免疫效果研究[J].中國人獸共患病雜志,2004(11):987-988.
    [11] 潘天虎.轉移因子與豬瘟疫苗聯合免疫的試驗報告[J].養殖與飼料, 2006(5):37-38.
     
     來源:豬病新干線  作者:李猶平1,房春林2,陳元坤1,劉宗秀1 
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